ХИМИЯ|МАТЕМАТИКА
РЕШЕНИЕ ЗАДАЧ
Курсовые|Рефераты Репетиторы по химии

Антитела человека с высокой аффинностью к фактору роста нервов человека

↑ Grab this Headline Animator

Изобретение раскрывает антитело человека или антиген-связывающий фрагмент антитела, который специфически связывает фактор роста нервов (NGF) человека с KD порядка 5 пМ или менее, не вступает в перекрестную реакцию с нейротрофином-3 (NT-3). Антитела полезны при лечении воспалительной боли, послеоперационной боли шва, нейропатической боли, боли при переломах, боли при остеопорозных переломах, постгерпетической невралгии, боли при остеоартрите, ревматоидном артрите, боли при раке, боли, вызванной ожогами, суставной боли при подагре, а также таких заболеваний, как гепатоклеточная карцинома, рак молочной железы и цирроз печени. В изобретении раскрыты нуклеиновая кислота, кодирующая антитело человека или его антиген-связывающий фрагмент, вектор экспрессии, содержащий нуклеиновую кислоту, и способ получения антитела или его антиген-связывающего фрагмента. На основе антитела или его фрагмента создана фармацевтическая композиция для лечения вышеперечисленных заболеваний, а также лекарственный препарат, дополнительно содержащий ингибитор IL-1, противоэпилептический препарат, антагонист цитокина и другой нейтрофин. Специфичность связывания NGF человека антителом или его фрагментом по изобретению в 2-10 раз выше, чем связывающая способность антитела или его фрагмента по отношению NGF крысы или мыши.

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к антителам человека и антиген-связывающим фрагментам антител человека, которые специфическим образом связывают фактор роста нервов (NGF) человека, и к терапевтическим способам применения указанных антител.

Материалы, использованные при подготовке заявки

Фактор роста нервов (NGF) был первым из обнаруженных нейротрофинов, и его роль в развитии и выживании как периферических нейронов, так и нейронов центральной нервной системы, была хорошо описана. Было показано, что NGF является важнейшим фактором выживания и сохранения функций при развитии периферических симпатических и эмбриональных сенсорных нейронов и базальных холинергических нейронов переднего мозга (Smeyne et al. (1994) Nature 368:246-249; Crowley et al. (1994) Cell 76:1001-1011). NGF активизирует экспрессию нейропептидов в сенсорных нейронах (Lindsay et al. (1989) Nature 337:362-364), и его активность опосредована двумя различными интегрированными в мембрану рецепторами, рецептором TrkA и общим рецептором нейротрофинов p75.

Уровень NGF повышен в синовиальной жидкости пациентов, страдающих ревматоидным артритом и другими формами артрита. Было показано, что антагонисты NGF предупреждают гиперальгезию и аллодинию на моделях нейропатической и хронической воспалительной боли у животных.

Антитела против-NGF описаны, например, в WO 01/78698, WO 02/096458, WO 2004/032870, в публикациях патентов США 2005/0074821, 2004/0237124 и 2004/0219144.

Формула изобретения

1. Антитело человека или антиген-связывающий фрагмент антитела, которые специфическим образом связывают фактор роста нервов (NGF) человека с KD порядка 5 пМ или менее, как определено посредством поверхностного плазмонного резонанса, где антитело или его фрагмент связывают NGF человека с KD от приблизительно в 2 раза до приблизительно в 10 раз выше чем антитело или его фрагмент связывают NGF крысы или мыши, где антитело или фрагмент антитела содержат определяющую комплементарность область 3(HCDR3) тяжелой цепи и область легкой цепи CDR3 (LCDR3), где HCDR3 и LCDR3 содержат аминокислотные последовательности, имеющие идентичность последовательности по меньшей мере 90% с аминокислотной последовательностью, представленной в SEQ ID NO:90 и 98, соответственно, и где антитело и фрагмент антитела дополнительно содержат HCDR1, HCDR2, LCDR1 и LCDR2, где HCDR1 представляет собой SEQ ID NO:86, HCDR2 представляет собой SEQ ID NO:88, LCDR1 представляет собой SEQ ID NO:94, и LCDR2 представляет собой SEQ ID NO:96.
2. Антитело человека или антиген-связывающий фрагмент антитела, которые специфическим образом связывают фактор роста нервов (NGF) человека с K D порядка 5 пМ или менее, где антитело или его антиген-связывающий фрагмент содержат вариабельную область тяжелой цепи (HCVR) и вариабельную область легкой цепи (LCVR), где HCVR и LCVR являются аминокислотными последовательностями, имеющими по меньшей мере 90% идентичности последовательности с аминокислотными последовательностями, представленными в SEQ ID NO:108 и 110 или SEQ ID NO:100 и 102.
3. Антитело человека или антиген-связывающий фрагмент антитела, которые специфическим образом связывают NGF человека с K D порядка 5 пМ, и содержит HCDR3 и LCDR3,
   где HCDR3 содержит аминокислотную последовательность формулы X¹ -Х²-Х³-Х⁴-Х⁵-Х⁶-Х⁷-Х⁸-Х⁹-Х¹⁰ -Х¹¹-Х¹²-Х¹³-Х¹⁴-Х¹⁵-Х¹⁶-X¹⁷-X¹⁸ (SEQ ID NO:537), где X¹ - Ala или Ser, X² - Thr или Lys, X³ -Glu или Ile, X⁴ - Phe или Gly, X⁵ - Val или Gly, X⁶ - Val или Trp, X⁷ - Val или Phe, X⁸ - Thr или Gly, X⁹ - Asn или Lys, X¹⁰ - Phe или Leu, X¹¹ - Asp или Phe, X¹² - Asn или Ser, X¹³ - Ser или отсутствует, X¹⁴ - Tyr или отсутствует, X¹⁵ - Gly или отсутствует, X¹⁶ - Met или отсутствует, X¹⁷ - Asp или отсутствует и Х¹⁸ - Val или отсутствует; и
   LCDR3 содержит аминокислотную последовательность формулы X¹-X²-X³-X⁴ -X⁵-X⁶-X⁷-X⁸-X⁹ (SEQ ID No:540), где X¹ - Gln, X² - Gln, X³ - Tyr, X⁴ - Asn, X⁵ - Arg или Asn, X⁶ - Tyr или Trp, X⁷ - Pro, X⁸ - Tyr или Trp и X⁹ - Thr.
4. Антитело человека или фрагмент антитела по п.3, дополнительно содержащие HCDR1, HCDR2, LCDR1 и LCDR2, где
   HCDR1 содержит аминокислотную последовательность формулы X¹-X²-X³-X⁴-X⁵-X⁶ -X⁷-X⁸ (SEQ ID No:535), где X¹ - Gly, X² - Phe, X³ - Thr или Asn, X⁴ - Phe или Leu, X⁵ - Thr или Asp, X⁶ - Asp или Glu, X⁷ - Tyr или Leu и X⁸ - Ser или Ala;
   HCDR2 содержит аминокислотную последовательность формулы X¹-X²-X³-X⁴ -X⁵-X⁶-X⁷-X⁸ (SEQ ID No:536), где X¹ - Ile или Phe, X² - Asp или Ser, X³ - Pro или Trp, X⁴ - Glu или Asn, X⁵ - Asp или Ser, X⁶ - Gly, X⁷ - Thr, Glu или Ser, X⁸ - Thr или Ile;
   LCDR1 содержит аминокислотную последовательность формулы X¹-X²-X³-X⁴-X⁵ -X⁶ (SEQ ID No:538), где X¹ - Gln или Arg, X² - Ala, Ser или Thr, X³ - Val или Ile, X⁴ - Arg или Thr, X⁵ - Asn, Phe или Tyr и X⁶ - Asp или Asn; и
   LCDR2 содержит аминокислотную последовательность формулы X¹-X²-X 3 (SEQ ID No:539), где X¹ - Gly или Ala, X² - Ala и X³ - Ser или Phe.
5. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело человека или его антиген-связывающий фрагмент по любому из пп.1-4.
6. Вектор экспрессии, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.5.
7. Способ получения антитела анти-NGF человека или антиген-связывающего фрагмента антитела, включающий стадии введения вектора экспрессии по п.6 в изолированную клетку-хозяин, выращивания клетки в условиях, допускающих производство антитела или фрагмента антитела, и получения антитела или фрагмента антитела, произведенного таким образом.
8. Способ по п.7, в котором клеткой-хозяином является клетка Е.coli, клетка СНО или клетка COS.
9. Фармацевтическая композиция для лечения патологического состояния или заболевания, опосредованных NGF, включающая антитело или антиген-связывающий фрагмент антитела по любому из пп.1-4 и фармацевтически приемлемый носитель.
10. Фармацевтическая композиция по п.9, дополнительно содержащая терапевтическое средство, выбранное из ингибитора интерлейкина-1 (IL-1), противоэпилептического препарата, антагониста цитокина и другого нейротрофина.
11. Фармацевтическая композиция по п.9, где лечение включает смягчение или подавление заболевания или патологического состояния, опосредованных NGF, в организме человека.
12. Фармацевтическая композиция по п.11, где патологическое состояние или заболевание, опосредованное NGF, подавляются без ощутимого нарушения координации движений.
13. Фармацевтическая композиция по любому из пп.9-12, где патологическое состояние или заболевание, опосредованные NGF, выбраны из группы, к которой относятся воспалительная боль, послеоперационная боль шва, нейропатическая боль, боль при переломах, суставная боль при подагре, постгерпетическая невралгия, боль, вызванная ожогами, боль при раке, боль при остеоартрите или ревматоидном артрите, ишиасе, боль, связанная с обострениями при серповидноклеточной анемии или постгерпетическая невралгия.
14. Применение антитела или антиген-связывающего фрагмента антитела по любому из пп.1-4 при производстве лекарственного препарата, применяемого для смягчения или подавления заболевания или патологического состояния, опосредованных NGF, в организме человека.
15. Применение по п.14, где патологическое состояние или заболевание, опосредованные NGF, подавляются без ощутимого нарушения координации движений.
16. Применение по п.14, где патологическое состояние или болезнь, опосредованные NGF, выбираются из группы, к которой относятся воспалительная боль, послеоперационная боль шва, нейропатическая боль, боль при переломах, суставная боль при подагре, постгерпетическая невралгия, боль, вызванная ожогами, боль при раке, боль при остеоартрите или ревматоидном артрите, ишиасе, боль, связанная с обострениями при серповидноклеточной анемии или постгерпетическая невралгия.
17. Применение по любому из пп.14-16 при производстве лекарственного препарата, используемого в сочетании с дополнительным терапевтическим средством, выбранным из ингибитора интерлейкина-1 (IL-1), противоэпилептического препарата, антагониста цитокина и другого нейротрофина.
18. Способ лечения связанных с NGF патологического состояния или заболевания, которые подавляются, улучшаются или облегчаются в результате ингибирования NGF, включающий введение первого и второго терапевтического средства человеку, при необходимости, где первое терапевтическое средство является антителом или антиген-связывающим фрагментом антитела, которые специфическим образом связывают фактор роста нервов (NGF) человека с KD порядка 5 пМ, как определено посредством поверхностного плазменного резонанса, где антитело или его фрагмент связывают NGF человека с K D от приблизительно в 2 раза до приблизительно в 10 раз выше чем антитело или его фрагмент связывает NGF крысы или мыши, и где указанным антителом или антиген-связывающим фрагментом являются антитело или антиген-связывающий фрагмент по любому из пп.1-4.
19. Способ по п.18, в котором вторым терапевтическим средством является ингибитор интерлейкина-1 (IL-1), противоэпилептический препарат, антагонист цитокина или другой нейротрофин.
20. Способ по п.18, в котором патологическое состояние или заболевание, опосредованные NGF, подавляются без ощутимого нарушения координации движений.
21. Способ по любому из пп.18-20, в котором патологическое состояние или болезнь, опосредованные NGF, выбираются из группы, к которой относятся воспалительная боль, послеоперационная боль шва, нейропатическая боль, боль при переломах, суставная боль при подагре, постгерпетическая невралгия, боль, вызванная ожогами, боль при раке, боль при остеоартрите или ревматоидном артрите, ишиасе, боль, связанная с обострениями при серповидноклеточной анемии или постгерпетическая невралгия.

    ---

Авторы изобретения: РАЙНХАРДТ Джоэл К. (US), МАКДОНАЛЬД Линн (US), ТОРРЕС Ричард (US), МОРРА Марк Р. (US), МАРТИН Джоэл Х. (US).

Другие открытия в области биохимии:

• Антитела человека с высокой аффинностью к фактору роста нервов человека

• Способ получения селеносодержащего препарата биомассы Laetiporus sulphureus MZ-22

• Живая аттенуированная бактерия Mycoplasma, вакцина содержащая ее и способ идентификации такой бактерии

Перейти к полному списку открытий

Присылайте свои научные статьи на электронный адрес admin@xumuktutor.ru, и мы опубликуем их абсолютно бесплатно на страницах нашего сайта. Ваши научные достижения станут известны всем (или почти всем).